一，骨組織切片及trap染色實驗步驟：
1、骨組織脫鈣要求：新鮮骨組織固定于4％多聚甲醛24h以上。將組織從固定液取出置于EDTA脫鈣液內脫鈣（不能用含酸的脫鈣液脫鈣），每3天換一次脫鈣液，至骨組織針扎可以順利通過為止。
2、取材：在通風櫥內用手術刀將目的部位組織修平整，將修切好的組織和對應的標簽放于脫水盒
3、脫水：將脫水盒放進吊籃里于脫水機內依次梯度酒精進行脫水。75％酒精4h-85％酒精 2h-90％酒精2h-95％酒精1h-無水乙醇I30min-無水乙醇II 30min-醇苯5-10min-二甲苯I5-10min-二甲苯II 5-10min-蠟I 1h-蠟II 1h-蠟iii 1h
4、包埋：將浸好蠟的組織于包埋機內進行包埋。先將融化的蠟放入包埋框，待蠟凝固之前將組織從脫水盒內取出按照包埋面的要求放入包埋框并貼上對應的標簽。于-20°凍臺冷卻，蠟凝固后將蠟塊從包埋框中取出并修整蠟塊。
二，傳統(tǒng)方法
1.將骨標本置于盛有脫鈣液的容器中放入小型臺搖床上（搖床振蕩為了更好的是脫鈣液和骨標本充分接觸），每天更換一次脫鈣液。
2.傳統(tǒng)方法實物圖
三，小美超聲脫鈣儀脫鈣
1.產品介紹：小美超聲XM-202A超聲脫鈣儀是一款能使骨標本快速脫去鈣質的方法，采用獨特脫鈣液配方在超聲波引導下，實現(xiàn)快速而又安全地將磷酸鈣、磷酸鎂、碳酸鈣等晶體分子解體，在微波加速下完成 脫鈣、固定與中性緩沖過程，同時100%保存組織形態(tài)結構和樣本的抗原特性，有利于后續(xù)進行的抗原修復處理。整個過程具有定時控溫滿足不同實驗要求。
2.實驗步驟：將骨標本置于盛有脫鈣液的容器中放入脫鈣機（注意脫鈣儀水槽中的水位要高于骨標本脫鈣液的水位。）設好時間360h（15天），溫度37℃。
3.實驗實物圖：
4.實驗結果：將超聲15天的骨標本切片后能滿意染色，組織無皺縮或腫脹等偽跡，保證制作成切片后的優(yōu)片率達95%以上，非常有利于后續(xù)的組織學處理，尤其是免疫組化染色，甚至滿足后續(xù)DNA檢測項目。
四，傳統(tǒng)方法(超聲波細胞破碎儀)和超聲脫鈣方法對比
1.節(jié)省脫鈣時間：使用快速脫鈣液骨髓穿刺、耳鼻軟骨組織脫鈣時間比常規(guī)脫鈣節(jié)省75%；對高密度的骨皮質脫鈣時間比傳統(tǒng)方法縮短40%至60%。
2.樣品溫控：37℃（溫度可調）.可避免或緩解因組織與脫鈣液發(fā)生化學反應而產生的升溫；超過攝氏50度時，還會破壞或改變骨標本的顯微組織形態(tài)，影響實驗的準確性。
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